Le dépistage du cancer du col fait l'objet actuellement de travaux importants afin d'affiner les méthodes de dépistage et tenter de mieux "sélectionner" les patientes qui semblent à plus haut risque d'avoir ou de développer un jour une lésion de haut grade. Ainsi le frottis cytologique "classique" qui présente une sensibilité de l'ordre de 60/70% pourrait être remplacé favorablement dans le futur proche par le test HPV en dépistage dit "primaire".
Mais, si la sensibilité d'un tel test HPV est élevée, sa spécificité reste faible en raison de la forte prévalence du virus dans la population générale, surtout avant 30 ans. Il serait donc utile de trouver un test complémentaire sensible mais également spécifique qui permettrait de séparer (ou trier) les infections HPV sans transformation de la cellule, de celles qui sont responsables d'une lésion potentiellement évolutive.
De même devant une cytologie avec des anomalies mineures (ASCUS ou Bas grade) où la prévalence des lésions de haut grade est faible (entre 7 & 15%), il pourrait être utile de "sélectionner" les patientes à plus haut risque de lésions de haut grade adressées en colposcopie et de surveiller les autres.
Le dual staining qui consiste en une double coloration immunocytochimique avec recherche de la protéine p16inka et du Ki 67 (qui témoigne de l'activité mitotique des noyaux) permettrait peut-être de répondre à ces attentes, en isolant les patientes doublement positives qui auraient dès lors un plus haut risque d'être porteuses de lésions de haut grade.
Une étude chinoise (1) a testé cette méthode de sélection sur une population de dépistage: sur 1079 patientes, le taux de positivité du double marquage (p16+ Ki67) était de 21,5%, celui-ci était de 15,8% quand le frottis était normal, 32.4% en cas de frottis ASCUS, 70.1% en cas de Frottis Bas grade, 94.5% en cas de frottis haut grade.
L'utilisation du Dual staining en sélection des anomalies mineures (ASCUS et Bas grade cumulés) présentait une sensibilité (SS) pour le diagnostic des lésions de CIN2+ de 87.5% (75.3-94.1) une spécificité (SP) de 66.4% (59.7-72.4), une valeur prédictive positive (VPP) de 37.5 (29.1-46.7), une valeur prédictive négative (VPN) de 95.8(91.2-98.1), une excellente surface sous la courbe (AUC (area under the curve) qui est un "résumé" des SS et SP) de 0.769, avec un taux de patientes adressées en colposcopie de 43.8%, l'utilisation du Test HPV hr dans la même situation (anomalies mineures) présentait une SS similaire de 91.7(80.5-96.7), une SP inferieure avec 55.8% (49.0-62.4), une VPP de 32.4(25.1-40.6), VPN de 96.7(91.7-98.7), AUC de 0.737(0.669-0.805) et un taux de patientes adressées supérieur avec 53.1% (50.0-56.2). Le test HPV présente donc dans cette situation une sensibilité légèrement supérieure mais une spécificité inferieure au Dual staining.
Les auteurs ont aussi testé le dual staining pour sélectionner des patientes après un dépistage primaire positif par un Test HPVhr pour le diagnostic des CIN2+. Ainsi le dual staining avait une SS de 92.7(88.4-95.4) ,et une SP de 52.7(46.4-58.8), le génotypage partiel 16/18 une SS inferieure avec 71.1(64.8-76.7) et une SP de 74.7(68.9-79.7), et la cytologie en deuxième intention une SS supérieure avec 94.5(90.6-96.8) et une spécificité de 53.5(47.2-59.6). Le taux de patientes adressées en colposcopie était respectivement de 68.7% pour le double marquage p16/Ki67, de 46.9 pour le génotypage partiel HPV16/18 et de 69.1 pour la cytologie.
Dans une étude multicentrique de référence (2) , les Sensibilités respectives du double marquage et du test HPV hr pour le diagnostic des CIN2+ étaient similaires avec des chiffres de 94.4% et de 100% après un diagnostic ASCUS, tandis que les spécificités étaient bien supérieures pour le double marquage avec 78.7 et de 60.4 pour le test HPV, de même après un diagnostic de bas grade avec des SS respectives similaires de 85.7 et de 98.4 et des SP de 53.3 pour le double marquage et seulement 15.6 pour le test HPVhr.
Dans une autre étude menée aux pays bas (3), testant les mêmes caractéristiques mais cette fois ci dans le dépistage des CIN3+ parmi les patientes présentant une dépistage primaire positif pour les HPV à Haut risque, la Sensibilité du double marquage p16+/Ki 67 était de SS=93.8% avec une SP de 51.2%, alors que la la cytologie de seconde intention présentait une SS=87.7% similaire mais une spécificité inferieure la SP=44.9%, les auteurs ont aussi testé la place du génotypage partiel HPV 16/18 couplé à la cytologie avec une SS plus élevée de 95.1% mais une spécificité très basse à 25.8%. les auteurs concluent donc ici aussi à l'utilité clinique du double marquage dont les performances permettent une meilleure sélection des patientes après un test HPV positif.
Ainsi ces nouveaux marqueurs cytologiques du dual staining ou double marquage encore appelé CINTecPlus® semblent pouvoir un jouer un rôle important dans la sélection des patientes présentant aussi bien des anomalies mineures (ASCUS & Bas grades cytologiques) que dans l'avenir devant un test HPV hr positif avec une bonne sensibilité pour dépister les lésions histologiques de haut grade et surtout une spécificité intéressante afin de ne pas sur explorer, sur inquiéter et surtout sur traiter des patientes sans risque important.
(La p16 est un biomarqueur moléculaire qui témoigne de l’expression de l’oncogène viral E7 au cours d’une infection par un HPV à haut risque. La sur-expression de cette fameuse p16 est liée à une interférence entre l’expression de l’oncogène viral E7 et le produit du gène pRb (Rb pour rétinoblastome) qui aboutit à un important rétrocontrôle négatif sur la répression de la transcription du gène de la p16, d'où son augmentation que l'on recherche par coloration cytoplasmique)
1- Evaluation of p16/Ki-67 dual staining in detection of cervical precancer and cancers: a multicenter study in China.
Yu LL, Chen W, Lei XQ, Qin Y, Wu ZN, Pan QJ, Zhang X, Chang BF, Zhang SK, Guo HQ, Qiao YL.
Oncotarget. 2016 Mar 23. doi: 10.18632/oncotarget.8307
2- Prospective evaluation of p16/Ki-67 dual-stained cytology for managing women with abnormal Papanicolaou cytology: PALMS study results.
Bergeron C, Ikenberg H, Sideri M, Denton K, Bogers J, Schmidt D, Alameda F, Keller T, Rehm S, Ridder R; PALMS Study Group.
Cancer Cytopathol. 2015 Jun;123(6):373-81. doi: 10.1002/cncy.21542. Epub 2015 Apr 17.
3- p16/Ki-67 dual-stained cytology for detecting cervical (pre)cancer in a HPV-positive gynecologic outpatient population.
Luttmer R1, Dijkstra MG2, Snijders PJ1, Berkhof J3, van Kemenade FJ4, Rozendaal L1, Helmerhorst TJ5, Verheijen RH6, Ter Harmsel WA7, van Baal WM8,Graziosi PG9, Quint WG10, Spruijt JW2, van Dijken DK11, Heideman DA1, Meijer CJ1.
Mod Pathol. 2016 May 6. doi: 10.1038/modpathol.2016.80.
